1 seul échantillon, 1 seule détermination 

ANtigènes des groupes sanguins : 
- portés par glycolipides ou glycopoténies
Classification
1. ABO et associsé = tissulaires 
   - GR mais pas que
   - pas propres à l'hommes
   - naturels
   - synthésisent enzymes qui vont produire les antigènes (pas de production directe par les gnes)
2. Rhésus et autres = inverse
Anticorps 
- naturels = apparait spontanément, présent milieu extérieur, stimule système immunatire
- immuns = après grossess, transfusion, greffe incompatible
- réguliers = toujours présent si antgne absent (ex: antiA)
- irrégulier = peut être absent malgré antigène (ex anti-D)
- 1 seul échantillon, 1 seule détermination si automatique (2 techniciens si manuel)
- Groupe sanguin = ABO, Réhus (RH2,3,4,5), KEL1
- Indications limitées : transfusion, grossesses (pour transfusion)
- Choix pour transfusion : 
- toujours ABO
- protocole RH-KEL1 : femmes de la naissance à fin période procréatrice, RAI positive, hémoglobinopathie, transfusion itératives, groupe sanguin rare
- Pour un groupe valide : 2 déterminations, 2 prélèvements indépendants, étiquettage et identité stricte du patient (risque vital !!)

Principe : antigène sur le globule rouge, anticorps dans le plasma.
Ex:
- groupe A = antigène A, anticorpsp antiB

Le plus important des groupes.
Nature glucidique : ABO -> glycosyl transférase
- groupe A = antigène A, anticorps antiB

Génétique: A et B co-dominant, O récessif

  Génétique: A et B co-dominant, O récessif

1 gène ABO
- allèle A et B : forte homologie, enzyme codée ont le même substrat (sustance H), codominant
- allèle A avec délétion : enzyme est inactivée
- donc 
   - groupe A = >= 1 allèle A , 0 allèle B
   - groupe B = >= 1 allèle B , 0 allèle A
Substance du base (tous les individus) -> enzyme H (codée par gène H chez la plupart des individus)
  - individu O = rien de plus
  - individu A: +enzyme A
  - individu B: +enzyme B
Substance H = produite par substrat H
Groupe Bombay = pas de gène H donc anticorps antiA, B et **H**
Donc 
- que du H = groupe A
- que du A = groupe A1 (fort)
- majoritairement A = groupe A2 (faible)
- idem B
2 épreuves :
1. antigènes A et B sur les globules rouges (mis avec sérum Ac antiA et B)
2. anticorps anti A et B dans plasma (avec hématies test A B)
**Concordance** entre les 2 épreuves

### Variants
A1 (80%) : 
   - enzyme A1 : convertit tous les antigène H en A -> *Anticorps naturel irrégulier anti-H* (dangereux si actif 37%)
   - Ag A1
A2 : enzyme A2 : convertit tous les antigène H en A
   - pas d'Ag A1 -> anticorps antiA1
   - pas d'anticorps antiH

- Phénotype bombay : absence d'antigène A, B et H -> anticorps anti-A,B et H très puissant !
- phénotypes H déficient : 
   - non sécréteur : Bombay (h/h se/e), Bombay réunion (un peu d'antigène H)
   - sécréteur (paraBombay) : AgH absent des globules rouges mais dans sécrétions
   - NB: -> anticorps antiH moins puissent pour Bombay réunion ou para-Bombay

- naturels : réguliers, surtout IgM, ne passent pas la barrière hémato-placentaire, 3 à 6 mois après la naissance
- immuns : irrégulier : après allo-immunisation (grosesse), hétéo (vaccins), IgG, passe la barrière hémato-placentaire

"Naturels" vs "immuns" (stimulation suplémentaires)

Antiènes dans le mileu extérieur (bactéries) -> immunisation
 - Recherche antigène A, B (à partir d'anticorps)
 - Recherche anticorps antiA, antiB (à partir hématie tests)
### Régles
Incompatibilité :
- donner des GR à un patient ayant dans le plasma des anticorps contre cet antigène
- donner du plasma avec des anticorps à un patient qui a des antigène sur le GR

- Recherche antigène A, B (à partir d'anticorps)
- Recherche anticorps antiA, antiB (à partir hématie tests)

Sinon hémolyse intra-vasculaire par activation du complément 
- libration des cytokines, protéines inflammataroie -> état de choc + arrêt cardiaque

## H 

## Hh  et SEse

   - codent pour la même enzyme mais sur des cellules différentes (H = érythroblaste, SE = muqueux, épithélial) avec production antigène H
   - h et se = silencieux ("non sécréteur")
    

- Peu utile pour transfusion

- enzyme produit antigene seulement dans cellules sécréteuse (muqueuse de glande salivaire, cellules inconnues)
- antigène adsorbé par le globule rouge et non produit

- Peu utile pour transfusion

- dépend du gène sécréteur (SE) et du gène Lewis (Le)
   - se/se et le/le : pas de sécrétion, pas de Lewis dans la cellules sécrétants = reste tel quel (précursieurs type)
   - se/se et LE : enzyme -> antigène Lewis a
   -  SE et LE : antigène H d'abor puis antigène Lewis b (action successive des 2 enzymes)

- défini à 2 ans donc pas d'impact obstrétrical
- chez la femme enceinte, les antigènes vont se décrocher
Anticorps : 
- naturels et irréguliers
- hémolysant dans certains cas

   Selon kit
## P1PK et globoside

Selon kit

- P1PK = 
   - 3 antigènes (P1, Pk, NOR)
   - anticorps : 
      - anti-P1 : fréquent, pas utile en transfusion ou obstétrique
      - anti-PP1PK = naturel, régulier, **attention transfusion**, **fausses couches précoces, à répétition**
- Globoside= 
   - 1 antigène P (très rarement absent)
   - allo anti-P = hémolyse transfusion
   - autoantiB = hémoglobinurie a frigorue
## Système LU
Gène LU
- 20 antigènes 
   - 4 couples d'antigènes dits antéthtiques car il faut au moins l'un des 2 (a ou b) (sinon très rare)
   - 12 ag fréquents
- Lutheran b = rare (impasse transfusionnelle)
- anticorps 
   - anti LU1 = rare
   - anti LU2 = très rare, actif à 37° donc *attention transfusion*
   - antiLU3 = receveur dangereux
## Antigène I et i
Ag i se transforme en I (sinon extrêment rare -> avec anticorps anti I: **pas de transfusion possible**)

Autre anticorps que ABO

  Autre anticorps que ABO

Principe: 3 hématies de phénotype O détectants anticorps contre antigènes
- RH a minima : D,C,c, e
- Kel: Kell, k, p
- FY: Fy^a, Fy^b
- JK: Jk^a, Jk^b
- MNS: M, N, S, s
- LE: Le^a, Le^b
- P_1
- Lu^b

   Principe: 3 hématies de phénotype O détectants anticorps contre antigènes
   - RH a minima : D,C,c, e
   - Kel: Kell, k, p
   - FY: Fy^a, Fy^b
   - JK: Jk^a, Jk^b
   - MNS: M, N, S, s
   - LE: Le^a, Le^b
   - P_1
   - Lu^b

Test plasma/sérum receveur avec hématies de la tubulure du produit à transfuser

   Test plasma/sérum receveur avec hématies de la tubulure du produit à transfuser

Test indirect

   Test indirect

   Montre sensibilisation des hématies avec anticorps antiIgG et antiC3d
# Technique IH 2024-01-08  (Patrik Jouveaux = référent national accréditation)

Montre sensibilisation des hématies avec anticorps antiIgG et antiC3d

  Applications IH
  - transfusion
  - suivi femmes enceintes
  - anémie hémolytique auto-immune (Coombs direct)
  Principe = agglutation hématies
  2 types
## Agglutination - Immunologique (mais pas tojours)
   1. Fixation antigène-anticorps mais réversible
   2. +/- agglutination (selon le type d'anticorsp: ##IgM est agglutinant##, IgG nécessite un "artificie")
   - spontané ou artificielle
   - Hématies = charge négative => se repoussent
   - Agglutination spontanée : surtout IgM, "froid" (4°), ne passent pas la barrière placentaire, 
   - activent complément (jusqu'à destruction de l'hématie, ex de l'accident ABO)
   - Agglutination artificielle : IgG, "chaud" (37°), passent barrière placentaire (plus petits),
   - -> problème de grossesse, ! **Ac anti JK** peut fixer le complément -> hémolyse intra-vasculaire comme accident ABO
   - il faut diminuer un potentiel dit zeta: 
   - diminution charge GR: enzymes protéolytique ("décapent" surface hématies)
   - favorisé par température, centrifugation, **antiglobuline* (Anticorps anti IgG ou IgM qui fait un pontage entre hématies)
   - test indirect (ex RAI) : plasma patient + globules rouges + antiglobuline
   - Test direct anitglobuline : GR patient porteur anticorps + antiglobuline
   Techniques:tube d'hémolyse, gel ou microplaques
   - gel : automatisable (agglutination = reste au sommet)
   - Phénotypage : Délai 1h sur gel ou tube
   Applications
   - Phénotype : ABO, Rhésus, Kell
   - RAI
   - Coombs direct (le patient a-t-il des anticorps fixés sur GR ?)
   - recherche agglutinine froide
   Tube prélevé sur anticoagulant (EDTA) + centrifugé -> plasma (Ac) ou GR (antigènes)
## Recherche d'agglutinines irrégulires
- Anticorps contre autre que antigènes autres que A et B (not. après transfusion...)
- EDTA, **frais**, plasma après centrification
- dépistage (1h) -> si positif, identification
Dépistage
- 3 hématies tests connues au contact avec plasma du patient
- si agglutination, reste en haut du puits (positif), sinon tombe
- semi-quantitatif : 1 à 4 croix
- antiglobuline dans le gel
Identification: sur 11 hématies tests (spécificité de l'anticorps)
- régle des 3+/3- : 3 hématies positives pour l'antigène et 3 négatives
Si positive : 
- vérifier absence de l'antigène correspondant à l'anticorps
- nouvelle carte de groupe
- TODO
Si négative: 
- **ne signifie pas absence anticorps** (concentration varie avec le temps)
- **Un anticorps un jour, un anticorps toujours**
Indication
- **RAI obligatoire avant toute transfusion** (sauf urgence vitale immédiate)
   - Valide 3 jours (jusque 21 jours si négatives et sans transfusion ou évènements immunisants (grossesse, fausse couche)
- 1 à 3 mois après transfusion
## Test direct à l'antiglobuline
On met en évidence les anticorps (ou fraction du complément) présents sur hématies du patients
- ajout antiglobuline humaine : agglutine si les anticorps existents
Technique
- Antiglobuline polyvente (IgG + complémenta)
- Antiglobuline spécifique (IgG et IgM)
Indication
- anémie hémolytique auto-immune
- maladie hémolytique néonatale : anticorps maternels sur antigènes foetaux (obligatoire sur tous les nouveaux nés)
- accident transfusionnelle (anticorps du patient sur globules rouges transfusés)
TDA positifs
- IgG : élution
- C3d : recherche agglutinines froides
## Élution directe
Détache ("lave") les anticorps des globules rouges.
Puis TIA pour regarder leurs spécificités
## Transition
Sensibilité pour allo-immunisation : éluat > TDA > RAI
- élution positive dans un premier temps car anticorps sont sur les globules rouges seuls (ex. d'une transfusion avec anticorps contre GR ) -> **RAI négative** !
- puis TDA+ (besoin de plus d'anticorps car l'élution fait une concentration)