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#+title: Spectromérie de masse
#+filetags: biochimie
Identification de différents composer en fonction de leur masse et charge
* 1. Pré-traitement
1. Précipitation des protéine: chélation, solvant, acide... puis centrifugation
2. Extraction des analytiques de la phase aqueuse initiale (dite extraction liquide-liquide car on utilise un autre liiquide)
3. Exraction sur un support solide (échantillon déposé dans un colonne qui retient les composants d'intérêtes en protégeant les molécules fragiles)
4. Commutation de colonne (on relie la colonne précédent à une autre)
* 2. Séparation
** Injection directe
** Chromatographie
Chromatograhpie = sépare les composé en fonction de leur tenmps de retention. Il y a 2 phase : une stationnaire (= dans colonne de séparation) et une mobile.
Les composés sont entraîné dans une colonne et ils vont se fixer sur la paroi selon leur affinité.
Pour la version gazeuses, les composés sont sous forme gazeuse et les 2 phases aussi.
Version liqiuide : idem mais on remplace le gaz par un gel e selice pour la phase stationnaire normale.
* 3. Détection par le spectromètre
4 composants
** 1. Source d'ions: permet de faire passer les analytiques en forme ionées
Plusieurs émthode
1. "dur" filament chauffé par un fort courant électrique -> émission d'électron -> leur énergie cinétique va produire des ions
2. électronébulisation "dource" : courant électrique très emplante -> goutelettes de liquie s trs chargées. Après évalporation, il y aura désorpotion (=relarguage) ions
3. chimique "douce" par ajout d'un gaz réactif (collision ion-molécules)
4. photoionization douce : lampe à décharge -> les photons interaisse avec les vapeurs produites par nébulisation
5. bombardemet d'ions rapidement (argon)
6. MALDI: crisalissation pui irradiation par un laser -> désorption des ions. Note: MALDI utile pour molécule polaires peu volatiles (ex: peptides)
** 2. Analyseur : les ions sont séparé en fonction de leur rapport masse/charge
Types:
- quadripole 4 électrodes avec un champ particulier qui va les attire vers le potentiel négatif puis les renvoyer vers la barre adjacente. Il existe une équation pour la trajection des ions : les zones de stabilité dépendent du rapport masse/chage
En pratique, c'est un filtre à ions
- à secteur magnétique: dans un champ magnétique, une particule subit une force de Lorentzy. On peut contrvoler le rayons et donc la diriger vers un détecteurs en fonction de m/z
- à temps de vof (TOF): un ion léger "vole" plus vite. Les ions sont accélérés jusqu'à un détecteurs
- à piège ionique : ils sont bloqué avec des champs électromagnétiques/statiques. Types = quadripolaires, linéaires, avec transformée de Fourier, Orbitrap
- en tandem : 2 analyseurs avec un chambre entre les 2. L'un analyse une population d'ions, qui est dans la chambre soumise aux chocs avec des molécules de gaz interne -> fragmentation en ion "fils" détecté par le second analyser
Avantage: il y a 2 propriétés physique (m/z de l'ion "parent" et "fils"). Couplé à chromato liquide, on peut utiliser le temps et supprer les majorité des interférence
- Couplage source/analyser
** 3. Détecteur : convertit courant ionique en courant électrique
** 4. Traitement du signal
* 4. Interprétation