#+TITLE: Ngs et syndromologie #+author: Frédéric Tran Mau-Them 3 millions en France, 30 millions en Europe clinique + bio+ ACPA, Xfra, gènes ciblés = 20% de diag Majorité des publis = 1-4 patients -> très rares * Exome Majorité des variations pathos sont dans exo Filtrer variants : - seuil de fréquence des SNP 1% -> > 10 000 variants -> 500 - on sélectionne gènes impliqué patho humaine -> 80 - gènes impliqué -> 10aine de variant max Puis valider les variants (NB: certains centres ne valident plus si c’est en trio et score de bonne qualité car on peut invalider par sanger des variantons de bonne qualité) Ex: VCF avec filtrage sur OMIM ** Exemple - 2014, pédiatrie: 26% de diag. 5% Données secondaires - 2016, adulte : solo -> 1% donnée secondaires (1-5% selon autres études). Plus de diagnostic si jeune ** Bioéthique on peut rendre les données incindentes (=non cherchées mais trouvées de manière fortuite). Pas de consensus pour les laboratoire. Par exemple à Dijon, incidentes si liste ACMG On ne rend pas les données secondaires (=pas de lien avec indication initiale mais cherchée à partir d’une liste de gène de manière intentionnelles)! Ex: variant tronquant APC (cancéro) : à rendre ? Actionnable car chir précoce potentiellement pour polypose familiale avis -> de novo non rare sur APC ** CNV exome adapté à la détection CNV (ex: utilisation XHMM) Principe : calcul profondeur moyenne de couverture -> nb de lectures diffère via un Z-score ? Même image mais moins de points que CGH : on est sur des exons ! Couverture plus homogène en CGH mais on peut passer à côté de la délétion d’un exon (il faut 3 sondes qui dévient dans le même sens, ce qui peut ne pas se voir sur des petits exons) Ex: Z-score -10 : négatif donc deletion. Htz ou Homozygote ? il faut regarder le nombre de lecture -> homozygote sur les 2 premiers ** Phénotype atypiques Genotype first Attention à l’extension du phénotype : il faut une analyse pangénomique, pour ne pas passer à côté d’une autre variation qui expliquerait les signes Pool parentaux : TODO ** Avantage (avant plateforme) 500-1000€, 2-6 mois, 30% diag (plus maintenant...) ** Inconvénient couverture hétérogène CNV parfois mal analysé Short reads non/mal vu * Génome - Exome - Génome + mitochondrie - Épigénome, transcriptome Vrai apport du génome: plus de variations et plus de mauvaises variations par exemple: bordure d’exon moins bien séquencée (cf diapo: 2x profondeur) Ex: inversion intronique Million/milliard variantios -> million si rare -> 1 000 si codant Avantage du génome : plus exhaustif, meilleure couverture Inconvénient : cher mais prix en diminution, peu adapté au somatique et ADN circulant (not. profondeur pour CNV. NB marche pas mal pour aneuploïdie) > 50% diag