#+title:      Spectrophotométrie
#+filetags:   :biochimie:


Longueur d'onde visible (100-800nm)
Loi de Beer-Lambert : relation entre l'absorbance (densité optique) et rapporté d'intensité luminieuses (incident et transmise)

* Méthodes
- consommation du substrat (acide urique)
- augmentation du produit (coenzyme A)

Pour limiter les interférences
- lecture à 2 longeures d'ondes différentes
- variantion de l'absorbance dans le temps
- soustraction du blanc (absorbance non spécifique)

* Interférence
Surestimé si hémoglobilen, ictère ou lactescence
- Ictère 480-505nm
- Hémolyse : 570-600nm
- Lactescence : 660-700nm
Vérifié si l'automate rende un valeur = intensité d'interférence

* Dosage colorimétrique en point final
- [[id:6a36feab-5f08-4d1d-9e3c-ae09d589daf2][Albumine]]
- [[id:02953d37-3891-43b1-9e07-cb4681e5e44c][bilirubine]]
- [[id:e618c88d-3a3a-483a-bb75-30dde2738c01][Calcium]]
- [[id:97cfbabe-78e8-49e8-8b00-01e47a6f2da9][Créatinine]]
- [[id:1aa04c29-ad9a-48e0-9392-73a8a5deee65][Fer]]
- [[id:bec091db-6da1-46ad-8c31-c55e551fbc36][Magnésium]]
- [[id:bab652dd-fa28-4dba-941d-7e4b32902525][Phosphore inorganique]]
- [[id:5ca3120e-340e-4228-9d79-8111105208f7][Protéines sériques totales]]
- [[id:6b2862c8-b11d-44d7-b5a4-abd1272b6e86][Protéines urinaires/LCR]]

* Dosage enzymatique en cinétique
** Absorbance propre
- [[id:0cd6155a-54ba-4718-a639-67944c6b1c47][Acide urique]]
** Clivé par l'enzyme à doser libérant un colorant
- [[id:257d79ff-411a-4ba7-83ed-459856b5d7fa][Phosphatase alcalines]]
- [[id:08f57dfb-caed-4cba-ac90-f0bcffcdb7b4][γGT (gammaglutamyl-transférase)]]
- [[id:c691319f-47cc-4586-86c6-121dae677abf][Lipase]]
- [[id:d70072d4-776f-4b80-8df7-0d2526ca269d][α-Amylase]]
** Substrat réagissant avec une enzyme utilisant le cofacteur NADH
Mesure 340nm
- [[id:5e7c2de5-958a-4d37-8796-4f18d45df53b][Urée]]
- [[id:977fa2d7-2989-4f7a-afa4-6be072722c41][Ammoniac]]
- [[id:90cbcd7e-9606-47b8-ad0b-2c4d38996b1b][Transaminases (ASAT, ALAT)]]
- [[id:0286b98f-eb1f-41f0-80c5-ecfe06e243da][Créatine kinase]]
- [[id:d3c7d1e8-2219-4be5-86e1-34c6dbc77a70][LDH]]
- [[id:48f25a79-0610-4804-b404-8d3aefdb918e][Glucose]]
- [[id:714ee729-bccd-4465-88df-04b8824f5098][Acide lactique]]
- [[id:b29858f9-80d4-409e-b006-ca8c80c3e849][Bicarbonates]]
- [[id:4e543bc3-7e7e-4f29-a0f2-898f4539b8e5][Éthanol]]
- [[id:b86a1b39-27b0-43e3-8630-7840234e9c71][Acides biliaires]]

** Réaction de Trinder
Réaction aboutissant à formation H2O2 qui va catalyse la synthèse d'un olorant
Interférence: ce qui dégrade le H2O2 (acide ascorbique (vitamine C), dopamine
- [[id:e5519b58-b8fd-4ae1-9585-aa5223d72431][Cholestérol HDL]]
- [[id:b2e9a998-da30-4b85-8f7d-6af80ce3c059][Cholestérol total]]
- [[id:3093198d-a9d2-4464-a453-9b6bffb03841][Cholestérole LDL]]
- [[id:f7fa1113-bc2f-4ca2-b99f-eb4a7f4ed346][Triglycérides]]