#+title: Inactivation de l’X #+date:<2022-06-27 Mon> #+author: Pr Valérie Malard Dégénerescene X -> Y Besoin d’un mécanisme de correction de dosage génique (XX chez femme, X homme) - drosophile = hypertranscription X - namtode : hypotranscription chez femelle 2 formes inactivation : - soumise à empreinte (marsupiaux) - non soumise à empreinte (Homme) Homme : mosaïcisme cellulaire chez la femme par inactivation au hasard de l’X paternel ou maternel - précocément embryogénèse - une fois le choix fait dans une cellule, toutes les cellules qui en découleront aurant le même profil - mécanisme réversible pendant la gamétogenèse Courbe de Gauss avec pic à 50/50 * Modélèe souris Tous les cellules inactivent X paternel - réactivation dans cellules à l’origine de l’embryon -> inactivation aléatoire - X paternel reste inactif dans les tissus extra-embryonnaire * Centre d’inactivation de l’X (XIC) *Xq13 = sous le centromère du bras long* (important !) 2Mb chez Homme Nombreux gènes non codant dont /XIST/ (cf infra) Rôle: - comptage : - la cellule détermine le ratio X/autosome (1 ou 2 par autosome normalement) - un seul X actif par cellule (XY ou 45X -> pas inactivation, XXX ->_2 Xi) - choix * Mise en place 1. comptage et choix X inactif 2. initiation : Xic est nécessaire et suffisant pour déclencher l’inactivation lorsqu’il est présente en 2 copies 3. Propagation de l’ARN Xist sur l’Xi en cis (recouvre tout le chr inactif) 4. stabilisation et maintien * ARN Xist = acteur principal Dans la région Xq13 /XIST/ exprimé à partir de l’X *inactif* -> initiateur principal de l’inactivation Régulation de Xist dans XIC - expression à partir d’un seul X et à un moment précis du developpement embryonnaire - peut inactiver n’importe quel chromosome dans lequel il a été introduit Expression ARN Xist ->_recrutement SPEN (effecteur majeur de l’inactivaton) -> .. (détail non à savoir) En pratique, modification des histones (remodelage chromatine) machinerie transcriptionnelle est enlevée X inactif déplacé en périphérie du noyau Souris != Homme chez qui il y a un décalage entre accumalation XIST et inactivation de l’X -> tardif et *graduel* Pourquoi ? Hypothèse : antagoniste XIST chez Hommes Création d’un comportamente nucléaire inactif (sauf les gènes qui échappent àla transcription) * Échappement 15% des gènes y échappent (100) -> région pseudo-autosomique = PAR1, PAR2 - PAR1 contient SHOX (haploinsuffisance = Turner, petite taille) - permettent apparement X et Y pendant la méiose 10% ont une expression variable entre les femmes certains ont un profil d’expression variable selon les tisus Certains gènes échappanent n’ont pas d’équivalent sur Y * Chr X inactif Réplication tardive Corpuscule de Barr Visible noyau interphasique hétérochromatine *facultative* () * Biais d’inactivation Préférentiel dans 90% des cellules techniques - cyto: réplication tardive de l’X inactif -> on peut les marquer (en fin de cycle) et dégrader les chromosome -> apparaît pâle - moléculaire : région polymorphique (spécifique inactif) méthylée sur X inactif X méthylé -> enzyme de restriction ne peut pas le couper -> seul l’X actif sera amplifié 2 bandes : on fait du semi-quantitif - random = 2 pics pour X (père et mère) - inactivation -> 1 seul pic car l’X paternel sera inactif) - si 80/20: 1 grand pic et 1 petit * Pathologies associées Primaire = variant /XIST/ Secondaire = variant gène X ou remaniement chormo, soit physiologique () - Primaire = inactivation biaisée depuis le début - Sélection secondaire = le plus courant : initialement inactivation aléatoire -> les cellules ayant choisi l’X inactif ne vont pas réussir à proliféer ** Remaniement chromosoqiue déséquiilbre - anneaux X: , délétion X iso Xq -> inactivation X anormal (biais de sélection) -> phénotype Turner car région PAR1 perdue suite à la malformation d’où haploinsuffisance - duplication sur l’X : phénotype normal si elles inactivent l’X dupliqué - translocation X : X remanié inactivé et s’étend sur le segment transloqué pour atténuer trisomie partielle mais phénotype anormal malgré tout ** Transloc X-autosome équilibré on transmet soit chr normal soit équiilbré X normal est le plus souvent inactif ! Mais phénotype normal, parfois FCS récurrente, dysfonctionnemet gonadique, peut forcer expression d’une maladie récessive liée à l’X ** Disomie functionelle Majorité des gènes de l’X : 1 seul allèle fonctionnel Si les gènes qui devaient être inactivé sont activés : disomie fonctionnelle - Transloc autosomoe équilibré : - Si X remanié inactivé : disomie fonctionnelle du segment transloqué qui va échapper à l’inactivion vu qu’il a été transloqué sur un autre chro (en mosaïque le plus souvent ) - Transloc autosome déséquilibré : pas de biais mais disomie fonctionnelle également du segment transloqué -> disomie partielle homogènes - anneaux : si très petit, on perd Xist donc l’anneau sera actif -> disomie fonctionnelle si extrèment petit, phénotype Turner car on a quaisement tout perdu - Duplication X - Garçon : pas le choix, inactivé X - fille : phénotype anormal si inactive X normal -> comme le garçon, souvent en mosaïque ** NB: FISH sur métaphase pour voir la localisation Pendant à une disomie fonctionnelle si suspicion transmission récessive liée à l’X -> ACPA * Conclusion Retenir Xist, /XIST/ (non codant), XIC = centre ARN Xist recouvre X inactif réversible Méthylation au niveau des gènes 15% des gènes y échappent